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メチル化DNA解析の代表的な手法として、バイサルファイト(亜硫酸水素塩)を利用した非メチル化塩基の置換反応があります。DNAのメチル化は、特徴的領域(CpGアイランド)のシトシン塩基に多く見られます。この試薬を用いると非メチル化シトシンをウラシルに変換することができます。そのため塩基配列を確認するだけで、どのシトシン塩基がメチル化しているか、また領域としてのメチル化パターンを見出すことが可能です。 またプライマーをメチル化部位に設定することで簡便にPCR(MSP法)にて、塩基置換によるプライマーの特異性を利用した解析することも可能です。 がん細胞における遺伝子のメチル化異常や、発生分化に見られる新規のメチル化の研究など、メチル化解析による遺伝子発現や疾病との相関の研究が盛んに行なわれ始め、生命科学研究はポストゲノム時代に突入したと言えます。 |
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